在蛋白質(zhì)組學(xué)研究與生物制藥質(zhì)量控制中,蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)檢測(cè)的靈敏度、定量準(zhǔn)確性與結(jié)果重復(fù)性是核心需求。Bio-Rad 推出的 ChemiDoc MP 成像系統(tǒng),憑借創(chuàng)新的光學(xué)設(shè)計(jì)與智能圖像處理技術(shù),突破傳統(tǒng)成像系統(tǒng)的性能瓶頸,為 Western Blot 檢測(cè)提供從定性到定量的全流程解決方案,正逐步重構(gòu)蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
從光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)來(lái)看,ChemiDoc MP 采用高分辨率冷 CCD 相機(jī)(分辨率達(dá) 1600×1200 像素)與 f/1.4 大光圈鏡頭,結(jié)合多波長(zhǎng) LED 光源(470nm、530nm、625nm、740nm),可實(shí)現(xiàn)化學(xué)發(fā)光、熒光、比色等多種檢測(cè)模式的靈活切換。其中,化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的檢測(cè)限可達(dá) 0.1pg 的重組 GFP 蛋白,較傳統(tǒng)成像系統(tǒng)(檢測(cè)限 1pg)靈敏度提升 10 倍,能夠捕捉低豐度蛋白質(zhì)的微弱信號(hào)。同時(shí),系統(tǒng)配備的暗箱采用雙層避光結(jié)構(gòu),背景噪聲控制在 0.1 counts/pixel 以下,確保微弱信號(hào)的精準(zhǔn)捕捉,為低豐度蛋白質(zhì)標(biāo)志物(如腫瘤相關(guān)蛋白 p53、磷酸化蛋白)的檢測(cè)提供可靠支持。
在定量分析性能上,ChemiDoc MP 搭載的 Image Lab 軟件展現(xiàn)出強(qiáng)大優(yōu)勢(shì)。該軟件支持 16 位灰度值采集,動(dòng)態(tài)范圍可達(dá) 4.8 個(gè)數(shù)量級(jí),能夠準(zhǔn)確量化信號(hào)強(qiáng)度差異超過(guò) 10?倍的蛋白質(zhì)條帶,避免傳統(tǒng) 8 位成像系統(tǒng)因動(dòng)態(tài)范圍不足導(dǎo)致的高豐度蛋白信號(hào)飽和問(wèn)題。例如,在檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2 與 Bax 的表達(dá)比例時(shí),Image Lab 軟件可通過(guò)條帶灰度值定量分析,計(jì)算出兩者的相對(duì)表達(dá)量,變異系數(shù)(CV)控制在 5% 以內(nèi),遠(yuǎn)低于行業(yè)平均的 10%,確保定量結(jié)果的重復(fù)性與可靠性。此外,軟件內(nèi)置的 “條帶自動(dòng)識(shí)別" 算法,可智能區(qū)分重疊條帶與背景干擾,自動(dòng)生成分子量標(biāo)記與定量報(bào)告,減少人為操作誤差,符合 GLP 規(guī)范要求。
在應(yīng)用場(chǎng)景拓展方面,ChemiDoc MP 的多功能性滿足不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求。在基礎(chǔ)科研領(lǐng)域,可用于蛋白質(zhì)表達(dá)量變化分析(如藥物處理后細(xì)胞內(nèi)靶蛋白的表達(dá)差異);在生物制藥領(lǐng)域,可用于重組蛋白純度檢測(cè)(如單克隆抗體的片段化分析);在臨床診斷研究中,可用于患者樣本中生物標(biāo)志物的半定量檢測(cè)(如肝炎病毒抗原檢測(cè))。某生物制藥企業(yè)利用 ChemiDoc MP 對(duì)單克隆抗體生產(chǎn)過(guò)程中的聚合體含量進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)熒光標(biāo)記法可準(zhǔn)確識(shí)別含量低于 1% 的聚合體,確保產(chǎn)品質(zhì)量符合 ICH Q6B 標(biāo)準(zhǔn)。
隨著蛋白質(zhì)組學(xué)研究向高通量、高精準(zhǔn)方向發(fā)展,ChemiDoc MP 成像系統(tǒng)將進(jìn)一步整合人工智能(AI)分析模塊,實(shí)現(xiàn)條帶識(shí)別、背景扣除、定量計(jì)算的全自動(dòng)化,為科研人員與質(zhì)量控制人員提供更高效、更精準(zhǔn)的檢測(cè)工具,推動(dòng)蛋白質(zhì)印跡技術(shù)在生命科學(xué)與生物醫(yī)藥領(lǐng)域的深度應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:Bio-Rad ChemiDoc MP 蛋白質(zhì)印跡 化學(xué)發(fā)光檢測(cè) Image Lab 軟件 定量分析