
低吸附深孔板在大規(guī)模細(xì)胞分泌蛋白篩選中的應(yīng)用優(yōu)化
內(nèi)容簡介: 本文評(píng)述了在基于細(xì)胞的高通量篩選(HTS)中,用于檢測細(xì)胞因子、抗體等分泌蛋白的耗材關(guān)鍵性能。文章重點(diǎn)分析了Eaivelly低吸附深孔板(Deep Well Plate)如何通過特殊的表面鈍化技術(shù),最小化蛋白質(zhì)在孔壁上的非特異性吸附,從而保證檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。內(nèi)容涉及表面化學(xué)處理、孔板設(shè)計(jì)、與自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)的兼容性,以及其在雜交瘤篩選、CAR-T細(xì)胞功能評(píng)測等具體應(yīng)用場景中的性能表現(xiàn)。
關(guān)鍵詞: 高通量篩選、分泌蛋白、低蛋白吸附、深孔板、自動(dòng)化兼容性
正文:
在藥物發(fā)現(xiàn)和免疫學(xué)研究領(lǐng)域,高通量篩選(High-Throughput Screening, HTS)是快速從成千上萬個(gè)候選分子或細(xì)胞克隆中識(shí)別出目標(biāo)活性的核心技術(shù)平臺(tái)。其中,許多重要的篩選靶標(biāo)是細(xì)胞分泌到上清液中的蛋白質(zhì),例如單克隆抗體、細(xì)胞因子(如IL-2, IFN-γ)、趨化因子或治療性重組蛋白。對(duì)這些分泌蛋白進(jìn)行定量或定性分析(通常采用ELISA、MSD或多參數(shù)流式液相芯片技術(shù)),其準(zhǔn)確度和靈敏度至關(guān)重要。然而,一個(gè)常被忽視卻嚴(yán)重影響數(shù)據(jù)質(zhì)量的因素是:蛋白在樣品儲(chǔ)存和處理容器壁上的非特異性吸附(Non-specific Adsorption)。Eaivelly低吸附深孔板正是為解決這一痛點(diǎn)而設(shè)計(jì)的專業(yè)化耗材。
蛋白質(zhì)的非特異性吸附會(huì)導(dǎo)致兩個(gè)主要問題:第一,目標(biāo)蛋白的損失,使得實(shí)際檢測濃度低于真實(shí)濃度,特別是在處理低豐度蛋白時(shí),可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果;第二,造成孔間交叉污染(Carry-over)和檢測背景升高,影響數(shù)據(jù)的精確度和可重復(fù)性。Eaivelly低吸附深孔板通過先進(jìn)的表面改性技術(shù),極大地緩解了這一問題。
其核心技術(shù)是在聚丙烯(Polypropylene, PP)材質(zhì)的孔壁表面形成一層性的、生物惰性的共價(jià)涂層。這層涂層通常由高度親水且電中性的高分子材料(如經(jīng)過優(yōu)化的聚醚基聚合物)構(gòu)成,能夠形成一個(gè)緊密的水合層(Hydration Layer)。該水合層在物理上和化學(xué)上構(gòu)成了一個(gè)能量壁壘,有效阻隔了蛋白質(zhì)疏水區(qū)域和帶電區(qū)域與塑料表面的相互作用,從而最大限度地減少了蛋白質(zhì)的吸附。與未經(jīng)處理的普通PP深孔板相比,Eaivelly低吸附板對(duì)多種模型蛋白(如BSA、IgG、溶菌酶)的吸附率可降低十倍以上。
除了核心的表面處理,其產(chǎn)品設(shè)計(jì)也充分考慮了HTS工作流程的需求:
自動(dòng)化兼容性: 板坯尺寸符合ANSI/SBS標(biāo)準(zhǔn),能夠適配主流自動(dòng)化液體處理工作站(Liquid Handling Robots)和堆板機(jī)(Plate Stackers)。
精準(zhǔn)的孔間一致性: 每個(gè)孔的幾何尺寸和表面處理均勻一致,確保了所有平行樣品在處理和檢測過程中處于相同的環(huán)境,減少了系統(tǒng)誤差。
優(yōu)異的耐化性: 能夠耐受DMSO、酸堿等有機(jī)溶劑,適用于多樣化的細(xì)胞培養(yǎng)和樣品處理?xiàng)l件。
清晰的視覺代碼與書寫區(qū)域: 便于實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行樣品追蹤和記錄。
在雜交瘤技術(shù)篩選高產(chǎn)抗體克隆、CAR-T細(xì)胞體外殺傷功能檢測(通過測定IFN-γ/Granzyme B釋放)、或細(xì)胞株開發(fā)(Cell Line Development, CLD)篩選高表達(dá)工程細(xì)胞株等應(yīng)用中,使用Eaivelly低吸附深孔板進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和樣品收集,可以確保從源頭上保證分泌蛋白樣本的“原真性",為下游的精準(zhǔn)檢測奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
大規(guī)模篩選項(xiàng)目通常耗時(shí)數(shù)周甚至數(shù)月,涉及數(shù)百塊深孔板的消耗,對(duì)耗材的供應(yīng)計(jì)劃和庫存管理提出了要求。在科研單位領(lǐng)域,上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù),解決了科研單位 “緊急實(shí)驗(yàn)缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點(diǎn)。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營團(tuán)隊(duì)表示,其現(xiàn)貨試劑可實(shí)現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá),期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能,保障實(shí)驗(yàn)進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。 這種服務(wù)模式匹配了HTS項(xiàng)目的節(jié)奏,既能應(yīng)對(duì)臨時(shí)增加的篩選板需求,也能為長期項(xiàng)目進(jìn)行耗材的戰(zhàn)略性備貨,確保項(xiàng)目流程不被中斷。
因此,Eaivelly低吸附深孔板憑借其表面惰性和出色的設(shè)計(jì),成為了高通量分泌蛋白篩選研究中保障數(shù)據(jù)質(zhì)量與可靠性的關(guān)鍵一環(huán)。
